一、試劑盒簡(jiǎn)介

EZBioscience miRNA加尾法逆轉(zhuǎn)錄試劑盒采用Poly(A)加尾反應(yīng)和逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)同步進(jìn)行的方法來(lái)進(jìn)行microRNAcDNA第一鏈的合成，與 microRNA的探針?lè)╝PCR系列試劑盒(貨號(hào):EZB-miProbe/EZB-miProbe-R0/EZB-miProbe-R1/EZB-miProbe-R2)配套使用。具體過(guò)程是，先通過(guò)Polv(A)Polymerase在microRNA的3末端加Polv(A)屋再使用Oligo(dT)-UniversalTag通用逆轉(zhuǎn)錄引物進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，最終生成microRNA的cDNA第一鏈。本試劑盒為包含去除基因組DNA的高效DNase的快速逆轉(zhuǎn)錄試劑盒，主要含有3管試劑:qDNA

RemovermiRNA RT Enzyme Mix4xmiRNARTBuffer。其中，aDNARemover中主要包括濃縮的 DNase和buffer，僅需室溫(19~27℃)反應(yīng)5分鐘，就能降解95%以上的基因組DNA，極大的降低了口能殘留的基因組對(duì)結(jié)果的干擾。

二、產(chǎn)品組分

三、保存條件 -20℃保存

四、EZBioscience miRNA加尾法逆轉(zhuǎn)錄試劑盒特點(diǎn)

1、miRNA加尾法逆轉(zhuǎn)錄的檢測(cè)通量高，因?yàn)橐淮文孓D(zhuǎn)錄即可完成對(duì)所有qPCR模板的制備，但是特異性差;

2、miRNA加尾法逆轉(zhuǎn)錄的檢測(cè)準(zhǔn)確性高，因?yàn)闄z測(cè)內(nèi)參基因和目的基因所使用的模板cDNA是同一管逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物;

3、在qPCR引物方面，各個(gè)目的miRNA以及內(nèi)參的反向引物都是通用的，不同的只是正向引物。因此在設(shè)計(jì)加尾法miRNA的qPCR引物時(shí)，只需設(shè)計(jì)特異性的正向引物即可。